Изучение процесса выделения фракции сквалена из люпина белого

Сквален представляет собой полиненасыщенный углеводородный тритерпен (C₃₀H₅₀), обладающий массой полезных свойств. Извлечение сквалена из дикорастущего люпина белого на сегодняшний день является экономически целесообразным и актуальным направлением в пищевой и фармакологической промышленности. Цель данного исследования – изучение процесса выделения фракции сквалена из люпина белого. Для исследований использовались липидная фракция образцов люпина, полученная методом экстракции по Сокслету. Определение содержания биологически активных веществ в исследуемом образце и поиск сквалена проводили с помощью метода газовой хроматографии. Визуализацию сквалена и сопутствующих веществ осуществляли с помощью химической детекции (окрашивание йодными парами). Установлено, что количество липидной фракции, выделенной из люпина белого, составляло 9,65 ± 0,3 %. Показано, что липидная фракция люпина белого содержит до 34,57% сквалена, кампестерола – 10,24%. Выявлено, что в исследуемом образце содержится 2‑метилоктакозан (содержание относительно других компонентов 9,62%), хенейкозан (содержание относительно других компонентов 8,33%) и бета-ситостерол (содержание относительно других компонентов 8,99%). Отмечено, что при экстракции в липидную фракцию перешел также люпеол (тритерпеноид). Используя метод ВЭЖХ, удалось получить фракцию, содержащую чистый сквален. Установлено, что из липидной фракции люпина может быть выделен сквален при применении смеси, состоящей из 95% этанола и 50% КОН. Процесс включает многостадийную экстракцию системой гексан–вода, обработку полученной фазы сульфатом натрия и последующую очистку методом жидкостной хроматографии, что позволяет достичь степени чистоты 98%. Предполагается, что выделенный из люпина белого сквален может использоваться для изготовления пищевых добавок и функциональных продуктов питания для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний человека.

1. Kim, S.-K., Karadeniz, F. (2012). Biological importance and applications of squalene and squalene. Chapter in a book: Advances in Food and Nutrition Research. Elsevier, 2012. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-416003-3.00014-7

2. Barp, L., Miklavčič Višnjevec, A., Moret, S. (2024). Analytical determination of squalene in extra virgin olive oil and olive processing by-products, and its valorization as an ingredient in functional food-a critical review. Molecules, 29(21), Article 5201. https://doi.org/10.3390/molecules29215201

3. Wu, L., Zhao, J., Wu, L., Zhang, Y., Li, J. (2022). Simultaneous determination of squalene, tocopherols and phytosterols in edible vegetable oil by SPE combined with saponification and GC–MS. LWT, 169, Article 114026. https://doi.org/10.1016/j.lwt.2022.114026

4. Pacetti, D., Scortichini, S., Boarelli, M.C., Fiorini, D. (2019). Simple and rapid method to analyse squalene in olive oils and extra virgin olive oils. Food Control, 102, 240–244. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2019.03.005

5. Yuan, C., Xie, Y., Jin, R., Ren, L., Zhou, L., Zhu, M. et al. (2017). Simultaneous analysis of tocopherols, phytosterols, and squalene in vegetable oils by highperformance liquid chromatography. Food Analytical Methods, 10(11), 3716–3722. https://doi.org/10.1007/s12161-017-0927-x

6. Gohil, N., Bhattacharjee, G., Khambhati, K., Braddick, D., Singh, V. (2019). Engineering strategies in microorganisms for the enhanced production of squalene: Advances, challenges and opportunities. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 7, Article 50. https://doi.org/10.3389/fbioe.2019.00050

7. Park, S.Y., Choi, S.J., Park, H.J., Ma, S.Y., Moon, Y.I., Park, S.-K. et al. (2020). Hexane extract of green tea (Camellia sinensis) leaves is an exceptionally rich source of squalene. Food Science and Biotechnology, 29, 769–775. https://doi.org/10.1007/s10068-019-00724-3

8. Purkiewicz, A., Czaplicki, S., Pietrzak-Fiećko, R. (2022). The occurrence of squalene in human milk and infant formula. International Journal of Environmental Research and Public Health, 19(19), Article 12928. https://doi.org/10.3390/ijerph191912928

9. Azri, A., Debouba, M., Bouajila, J., Yeshitila, M., Cerny, M., Lacroux, E. et al. (2025). Lipids composition, fatty acid and squalene contents in a wide Amaranth collection. Journal of Food Composition and Analysis, 148(Part 2), Article 108305. https://doi.org/10.1016/j.jfca.2025.108305

10. Lozano-Grande, M.A., Gorinstein, S., Espitia-Rangel, E., Dávila-Ortiz, G., Martínez-Ayala, A.L. (2018). Plant sources, extraction methods, and uses of squalene. International Journal of Agronomy, 2018, Article 1829160. https://doi.org/10.1155/2018/1829160

11. Ryan, E., Galvin, K., O’Connor, T. P., Maguire, A.R., O’Brien, N.M. (2007). Phytosterol, squalene, tocopherol content and fatty acid profile of selected seeds, grains, and legumes. Plant Foods for Human Nutrition, 62(3), 85–91. https://doi.org/10.1007/s11130-007-0046-8

12. Popa, O., Băbeanu, N. E., Popa, I., Niță, S., Dinu-Pârvu, C. E. (2015). Methods for obtaining and determination of squalene from natural sources. BioMed Research International, 2015(1), Article 367202. https://doi.org/10.1155/2015/367202

13. Sheng, Y. Y., Xiang, J., Wang, K. R., Li, Z. Y., Li, K., Lu, J. L. et al. (2022) Extraction of squalene from tea leaves (Camellia sinensis) and its variations with leaf maturity and tea cultivar. Frontiers in Nutrition, 9, Article 755514. https://doi.org/10.3389/fnut.2022.755514

14. Vázquez, L., Torres, C. F., Fornari, T., Señoráns, F.J., Reglero, G. (2007). Recovery of squalene from vegetable oil sources using countercurrent supercritical carbon dioxide extraction. Journal of Supercritical Fluids, 40(1), 59–66. https://doi.org/10.1016/j.supflu.2006.04.012

15. Nergiz, C., Çelikkale, D. (2011). The effect of consecutive steps of refining on squalene content of vegetable oils. Journal of Food Science and Technology, 48(3), 382–385. https://doi.org/10.1007/s13197-010-0190-2

16. Cheng, L., Ji, T., Zhang, M., Fang, B. (2024). Recent advances in squalene: Biological activities, sources, extraction, and delivery systems. Trends in Food Science and Technology, 146(1), Article 104392. https://doi.org/10.1016/j.tifs.2024.104392

17. Kalogeropoulos, N., Andrikopoulos, N. K. (2004). Squalene in oils and fats from domestic and commercial fryings of potatoes. International Journal of Food Sciences and Nutrition, 55(2), 125–129. https://doi.org/10.1080/09637480410001666531

18. Gunes, F. (2013). Medical use of squalene as a natural antioxidant. Journal of Marmara University Institute of Health Sciences, 3(4), 221–229. https://doi.org/10.5455/musbed.20131213100404

19. Duan, Y., Gong, K., Xu, S., Zhang, F., Meng, X., Han, J. (2022). Regulation of cholesterol homeostasis in health and diseases: From mechanisms to targeted therapeutics. Signal Transduction and Targeted Therapy, 7, Article 265. https://doi.org/10.1038/s41392-022-01125-5

20. Panov, A.V., Mayorov, V.I., Dikalov, S.I. (2024). Role of fatty acids β-oxidation in the metabolic interactions between organs. International Journal of Molecular Sciences, 25(23), Article 12740. https://doi.org/10.3390/ijms252312740

21. Самков, А. А., Волченко, Н. Н., Худокормов, А. А., Калашников, А. А., Веселовская, М. В. (2014). Анаэробная биодеградация органических соединений в микробных топливных элементах. Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета, 101, 496–510.

22. Zhao, H., Song, Z., Liu, X., Gong, S., Tang, Q., Liu, C. et al. (2025). Functional characterization of squalene epoxidases from Siraitia grosvenorii. Plants, 14(12), Article 1740. https://doi.org/10.3390/plants14121740

23. Rosales-Garcia, T., Jimenez-Martinez, C., Davila-Ortiz, G. (2017). Squalene extraction: Biological sources and extraction methods. International Journal of Environment, Agriculture and Biotechnology, 2(4), 1662–1670. https://doi.org/10.22161/ijeab/2.4.26

24. Кувакин, С. Г., Харченко, С. М., Королева, Ю. А., Кириллова, Д. Д., Шаталов, Д. О. (29 ноября 2025). Разработка методов стандартизации сквалена. Cборник материалов XI Всероссийской научно-практической конференции с международным участием: Перспективы внедрения инновационных технологий в медицине и фармации. Электрогорск: АО «ЭКОлаб»; Орехово-Зуево: ГГТУ, 2025.

25. Лобода, А. В., Никонович, С. Н., Тимофеенко, Т. И. (2009). Биологически активная добавка «Сквален-Лецитин» на основе семян амаранта. Краснодар: Издательский Дом Юг, 2009.

26. Агафонова, С. В., Рыков, А. И. (2021). Химический состав семян растения Lupinus angustifolius L. и Lupinus albus L. Калининградской области. Химия растительного сырья, 3, 135–142.

27. Писарев, Д. И., Новиков, О. О., Бочарникова, М. А., Васильева, Ю. Г., Малютина, А. Ю. (2016). Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах. Научный результат. Медицина и фармация, 2(4), 43–53.

28. Терехова, Т. С., Фурсова, А. В., Офицеров, Е. Н. (2013). Качественное и количественное определение сквалена в маслах и реакционных смесях методом ВЭЖХ. Успехи в химии и химической технологии, 27(4(144)), 84–89.

29. He, H.-P., Cai, Y., Sun, M., Corke, H. (2002). Extraction and purification of squalene from amaranthus grain. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50(2), 368–372. https://doi.org/10.1021/jf010918p

30. Wandira, I., Legowo, E. H., Widiputri, D. I. (2017). Optimization of squalene produced from crude palm oil waste. AIP Conference Proceedings, 1803(1), Article 020061. https://doi.org/10.1063/1.4973188

31. Павлова, О. В., Калистратова, А. В., Офицеров, Е. Н. (2020). К проблеме определения сквалена в масле растений рода Amaranthus и продуктах его трансформации. Успехи в химии и химической технологии, 34(7(230)), 32–34.

32. Siddique, H. R., Saleem, M. (2011). Beneficial health effects of lupeol triterpene: A review of preclinical studies. Life Sciences, 88(7–8), 285–293. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2010.11.020

33. AlMousa, L. A., Pandey, P., Lakhanpal. S., Kyada, A. K., Nayak. P. P., Hussain, A. et al. (2025). An updated review deciphering the anticancer potential of pentacyclic triterpene lupeol and its nanoformulations. Frontiers in Pharmacology, 9(16), Article 1594901. https://doi.org/10.3389/fphar.2025.1594901

34. Kumar, L. R. G., Tejpal, C. S., Anas, K. K., Chatterjee, N. S., Anandan, R., Mathew, S. et al. (2023). Squalene: Bioactivity, extraction, encapsulation, and future perspectives. Chapter in a book: Marine Antioxidants, Elsevier, 2023. https://doi.org/10.1016/B978-0-323-95086-2.00038-2

35. Bañares, C., Antezana, A.V., Chabni, A., Ramirez-Veliz, C., Intiquilla, A., Jiménez-Aliaga, K. et al. (2026). Revalorization of Lupinus mutabilis seed oil via clean expeller extraction and comprehensive chemical characterization. Journal of Food Composition and Analysis, 152, Article 109023. https://doi.org/10.1016/j.jfca.2026.109023

36. Kraujalis, P. (2014). Optimisation of fractionation process of amaranth (Amaranthus spp.) by applying high pressure extraction methods. Doctoral Dissertation Kaunas University of Technology, Technological Sciences, Chemical Engineering, 05T. Kaunas, 2014.

37. Bruni, R, Guerrini, A, Scalia, S, Romagnoli, C, Sacchetti, G. (2002). Rapid techniques for the extraction of vitamin E isomers from Amaranthus caudatus seeds: ultrasonic and supercritical fluid extraction. Phytochemical Analysis, 13(5), 257–261. https://doi.org/10.1002/pca.651

38. Bhattacharjee, P., Chatterjee, D., Singhal, R. (2012). Supercritical carbon dioxide extraction of squalene from Amaranthus paniculatus: Experiments and process characterization. Food and Bioprocess Technology, 5, 2506–2521. https://doi.org/10.1007/s11947-011-0612-9

39. He, H.-P., Corke, H. (2003). Oil and squalene in Amaranthus grain and leaf. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51(27), 7913–7920. https://doi.org/10.1021/jf030489q

40. Náthia-Neves, G., Getachew, A. T., Ghelichi, S., Jacobsen, C. (2025). The use of green technologies for processing lupin seeds (Lupinus angustifolius L.): Extraction of non-polar and polar compounds for concentrated-protein flour production. Food Research International, 200, Article 15434. https://doi.org/10.1016/j.foodres.2024.115434

41. Adi, P., Mutiara, W. (2024). Review: Exploration of squalene from natural materials as its potential in health and food fields. Indonesian Journal of Chemical Engineering, 2(2), 79–89. https://doi.org/10.26555/ijce.v2i2.1423

42. Narayan Bhilwade, H., Tatewaki, N., Nishida, H., Konishi, T. (2010). Squalene as novel food factor. Current Pharmaceutical Biotechnology, 11(8), 875–880. https://doi.org/10.2174/138920110793262088

43. Sponton, O. E., Perez, A. A., Osella, C., Cuffia, F., Fenoglio, C., Piagentini, A., Santiago, L. G. (2023). Squalene encapsulation by emulsification and freeze-drying process: Effects on bread fortification. Journal of Food Science, 88(6), 2523–2535. https://doi.org/10.1111/1750-3841.16576

44. Kumar, L.R.G., Sanath Kumar, H., Tejpal, C.S., Anas, K.K., Nayak, B.B., Sarika, K. et al. (2021). Exploring the physical and quality attributes of muffins incorporated with microencapsulated squalene as a functional food additive. Journal of Food Science and Technology, 58(12), 4674–4684. https://doi.org/10.1007/s13197-020-04955-9

45. Herrera-Marcos, L.V., Martínez-Beamonte, R., Arnal, C., Barranquero, C., Puente-Lanzarote, J.J., Herrero-Continente, T. et al. (2023). Dietary squalene supplementation decreases triglyceride species and modifies phospholipid lipidomic profile in the liver of a porcine model of non-alcoholic steatohepatitis. Journal of Nutritional Biochemistry, 112, Article 109207. https://doi.org/10.1016/j.jnutbio.2022.109207

46. Buddhan, S., Sivakumar, R., Dhandapani, N., Ganesan, B., Anandan, R. (2007). Protective effect of dietary squalene supplementation on mitochondrial function in liver of aged rats. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids, 76(6), 349–355. https://doi.org/10.1016/j.plefa.2007.05.001

47. Micera, M., Botto, A., Geddo, F., Antoniotti, S., Bertea, C.M., Levi, R. et al. (2020). Squalene: More than a step toward sterols. Antioxidants, 9(8), Article 688. https://doi.org/10.3390/antiox9080688

48. Reddy, L.H., Couvreur, P. (2009). Squalene: A natural triterpene for use in disease management and therapy. Advanced Drug Delivery Reviews, 61, 1412–1426. https://doi.org/10.1016/j.addr.2009.09.005

49. Narayan Bhilwade, H., Tatewaki, N., Nishida, H., Konishi, T. (2010). Squalene as novel food factor. Current Pharmaceutical Biotechnology, 11(8), 875–880. https://doi.org/10.2174/138920110793262088